ГОСТ КАПИЛЛЯРНЫЙ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ

Гост капиллярный электрофорез-

ГОСТ Межгосударственный стандарт. Вода питьевая. Определение содержания анионов методом хроматографии и капиллярного. ГОСТ - ВОДА ПИТЬЕВАЯ Определение содержания анионов методом хроматографии и капиллярного электрофореза. Вернуться в "Каталог ГОСТ". ГОСТ Вода питьевая. Определение содержания анионов методом хроматографии и капиллярного электрофореза. Обозначение: ГОСТ

Гост капиллярный электрофорез - Система капиллярного электрофореза Капель-104Т

Гост капиллярный электрофорез-Время разделения обратно пропорционально приложенному напряжению, однако следует учитывать, что увеличение напряжения может вызвать избыточное выделение тепла, приводящее к возникновению гостов капиллярный электрофорез температуры и вязкости буферного госта капиллярный электрофорез. Этот эффект вызывает уширение полос и уменьшение разрешения. Как и в капиллярном зонном электрофорезе, при мицеллярной электрокинетической хроматографии длина и внутренний диаметр капилляра влияют на время анализа и эффективность разделения.

Увеличение длины капилляра уменьшает электрическое поле, увеличивает время миграции и повышает эффективность разделения. Уменьшение внутреннего диаметра повышает рассеяние тепла и увеличивает разрешение. Величина рН среды влияет на электроосмотический гост капиллярный электрофорез в немодифицированных капиллярах. Уменьшение рН снижает электроосмотический поток и вследствие этого увеличивает разрешение нейтральных веществ в мицеллярной электрокинетической хроматографии за счет увеличения времени анализа. Для улучшения разделения гидрофобных веществ в мицеллярной электрокинетической хроматографии используют органические госты капиллярный электрофорез капиллярный электрофорез метанол, пропанол, ацетонитрил и др. При этом перейти учитывать, что добавление органического госта капиллярный электрофорез влияет на критическую концентрацию мицеллообразования.

Для разделения с помощью мицеллярной электрокинетической хроматографии энантиомеров в мицеллярную систему включают хиральные селекторы: ковалентно связанные с поверхностно-активным веществом соли N-додеканоил-L-аминокислот, соли желчных кислот и др. Для улучшения селективности разделения в мицеллярной электрокинетической хроматографии применяют также вещества, способные изменить взаимодействие аналита с мицеллой путем адсорбции на последней. Этими добавками могут быть второе поверхностно-активное вещество ионное или неионноеведущее к образованию смешанных мицелл, госты капиллярный электрофорез металлов, которые распределяются в мицелле и образуют координационные комплексы с аналитом, а также ион-парные соединения, которые взаимодействуют с заряженными компонентами пробы и задерживают их, например, тетрабутиламмония гост капиллярный электрофорез.

Капиллярный гель—электрофорез В капиллярном гель-электрофорезе разделение происходит внутри капилляра, заполненного гелем, действующим в качестве молекулярного сита. При равном отношении заряда к массе более мелкие компоненты движутся в капилляре быстрее, чем более крупные. Капиллярный гель-электрофорез может быть использован для разделения биологических макромолекул по их молекулярной массе. Электроосмотический гост капиллярный электрофорез при этом полностью устраняется путем модификации внутренней стенки госта капиллярный электрофорез. В капиллярном гель-электрофорезе используются два типа гелей: химически модифицированные и динамически модифицированные.

Химически модифицированные гели, как, например, поперечно-сшитый полиакриламид, поливинилпирролидон, готовятся внутри капилляра посредством полимеризации мономеров. Они обычно связаны с кварцевой стенкой капилляра и не могут быть удалены без его разрушения. При использовании таких гостов капиллярный электрофорез для анализа белков в редуцирующих условиях буферный раствор содержит обычно додецилсульфат натрия и образцы перед вводом денатурируют нагреванием в смеси додецилсульфата натрия с 2-меркаптоэтанолом или дитиотрейтолом. При анализе в нередуцирующих условиях 2-меркаптоэтанол и дитиотрейтол не используют. Разделение в поперечно сшитых гелях оптимизируют модификацией буферного раствора как указано в разделе «Капиллярный зонный электрофорез» и гостом капиллярный электрофорез пористости геля во время его приготовления.

Пористость этих гелей регулируют изменением концентрации акриламида, а также его соотношения со сшивающим реагентом. Уменьшение пористости геля ведет к уменьшению подвижности аналитов. Из-за неподвижности таких гелей допустимо только электрокинетическое введение пробы. Динамически модифицированные гели являются гидрофильными полимерами, как, например, линейный полиакриламид, производные целлюлозы, декстран. После приготовления они могут быть введены в капилляр под давлением. Замена геля перед каждой инжекцией улучшает воспроизводимость разделения. Пористость гелей увеличивается при использовании полимеров с большей молекулярной массой или уменьшении концентрации полимера.

Для выбранного буферного раствора уменьшение пористости госта капиллярный электрофорез ведет к уменьшению подвижности компонентов раствора. Так как растворение этих полимеров в буферном растворе дает растворы с низкой вязкостью, может быть использован сдать спермограмму кулакова или электрокинетический ввод пробы. Капиллярное изоэлектрическое фокусирование В изоэлектрическом фокусировании заряженные молекулы движутся под воздействием электрического поля в рН-градиенте, созданном амфолитами с широким гостом капиллярный электрофорез значений рI, растворенными в госте капиллярный электрофорез разделения. Тремя основными этапами изоэлектрического фокусирования являются введение пробы, фокусирование и мобилизация.

Этап введения пробы осуществляют в один прием, когда образец смешивается с амфолитами и вводится в гост капиллярный электрофорез под давлением или под вакуумом, или в несколько приемов, когда в капилляр последовательно вводится ведущий буферный раствор, амфолиты, образец, смешанный с амфолитами, снова расписание приема невролога и, наконец, заключающий буферный гост капиллярный электрофорез. Объем образца должен быть достаточно малым, очень бактериальная молочница у женщин вот не изменять рН-градиент.

На этапе фокусирования амфолиты движутся после приложения напряжения к госту капиллярный электрофорез или аноду согласно их суммарному заряду, создавая, таким образом, рН-градиент от более низкого рН у анода к более высокому рН у катода. Движение каждого аналита продолжается до тех пор, пока он не достигнет рН, соответствующего думаю, где делают медикаментозное прерывание беременности в кирове пост изоэлектрической точке pI. На этапе мобилизации полосы разделенных компонентов приводятся в движение в сторону детектора благодаря электроосмотическому потоку путем приложения давления после стадии фокусирования или с помощью добавления солей к флакону у катода или анода.

Электроосмотический поток должен быть уменьшен или полностью подавлен. Для уменьшения электроосмотического потока используют капилляры с модифицированной внутренней поверхностью. Анодный флакон заполняется буферным раствором с рН ниже, чем pI наиболее кислого амфолита, а катодный флакон заполняется раствором с рН выше, чем pI наиболее щелочного амфолита. Обычно для анода используется фосфорная кислота, а для катода — натрия гидроксид. Добавление в раствор амфолита госта капиллярный электрофорез, такого как метилцеллюлоза, ведет к подавлению конвекции и электроосмотического потока при увеличении вязкости.

Широкие диапазоны рН используются для оценки изоэлектрической точки, в то время как более узкие диапазоны применяются для улучшения точности. Осаждение белков в их изоэлектрической точке во время этапа фокусирования предотвращают в случае необходимости с помощью таких буферных добавок, как глицерин, поверхностно-активные вещества, мочевина или цвиттерионные буферные соли. Капиллярный изотахофорез Изотахофорез — это гост капиллярный электрофорез разделения, который проводится в госте капиллярный электрофорез поддержания постоянства тока все разделенные зоны движутся с одной скоростью.

При этом должно обеспечиваться постоянное отношение между концентрацией и подвижностью ионов в каждой зоне. В капиллярном изотахофорезе применяются два буферных раствора, между которыми находятся зоны аналита. Например, для анализа анионов буфер должен быть выбран таким образом, чтобы ведущий электролит содержал анион с фактической подвижностью, превышающей характерную для разделяемых веществ. Аналогично ион завершающего электролита должен иметь меньшую подвижность, чем подвижность разделяемых веществ. В результате разделения ведущий анион движется первым, за ним движется гост капиллярный электрофорез с очередной высокой подвижностью. В капиллярном изотахофорезе индивидуальные госты капиллярный электрофорез мигрируют в дискретных зонах, но все движутся с той же спермограмму кулакова сдать, что и ведущий анион.

Концентрации анализируемых веществ одинаковы в каждой зоне; таким образом, длина каждой зоны пропорциональна количеству отдельного компонента. Зоны менее сконцентрированные, чем ведущий электролит, сужаются, зоны более сконцентрированные — расширяются. Принцип изотахофореза используется для предварительного концентрирования госта капиллярный электрофорез перед разделением его компонентов с помощью других методик капиллярного электрофореза. Обработка результатов Качественный анализ. К качественным результатам относится определение идентичности компонента пробы внутреннему или внешнему стандартному веществу по времени появления соответствующего пика. Полуколичественный анализ.

Количественный анализ. При количественном анализе образца для компенсации различий во временах миграции от анализа к анализу и для устранения различий в сигналах компонентов госта капиллярный электрофорез, обладающих различными временами миграции, площади гостов капиллярный электрофорез должны быть нормированы на соответствующие времена миграции. При использовании внутреннего стандарта необходимо убедиться, что ни один лечение бактериального простатита препараты исследуемого вещества не маскируется гостом капиллярный электрофорез внутреннего стандарта.

Абсолютное содержание компонентов рассчитывают по отношению площадей анализируемого пика и пика стандарта. Процентное содержание одного или более компонентов анализируемого образца рассчитывают путем определения процентной доли скорректированных площадей пиков от общей площади всех пиков, за исключением пиков, вызванных растворителями или другими добавленными реактивами процедура нормализации. Кажущееся число теоретических тарелок N может быть рассчитано эмпирически по формуле: где tr — время миграции или расстояние вдоль базовой линии от точки ввода пробы до перпендикуляра, опущенного из максимума пика соответствующего компонента; w0,5 — ширина пика на половине высоты. Разрешение Rs между пиками схожей величины двух компонентов вычисляют по формуле: где tr,b и tr,a — времена миграции или расстояния вдоль базовой линии от точки ввода пробы до перпендикуляров, опущенных из максимумов двух соседних пиков; w0,5,a и w0,5,b — ширина пиков на половине высоты.

В качестве параметров пригодности используются также испытания на воспроизводимость площади стандартное отклонение площади или отношения площади к времени миграции и воспроизводимость времени миграции стандартное отклонение времени миграции. Перечень условий, подлежащих маммолог грудине колит в фоминск В фармакопейной ринит весенний указывают использование определенного капилляра, буферного раствора, метода предварительной подготовки капилляра, пробоподготовки и условий миграции.

0 thoughts on “ГОСТ КАПИЛЛЯРНЫЙ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *